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    生化自動分析儀項目間試劑的交叉污染及其避免方法

    日期:2015-09-07 14:27:23

    很多類型的全自動生化分析儀因其清洗系統的工作模式所致,一個項目對緊隨其后的一個甚至幾個項目的測定會帶來一定程度的試劑污染,并且隨著儀器使用時間的累加,儀器狀況的下降,試劑交叉污染的程度會有所加劇。在實際工作中主要表現為某一項目的測定結果一直符合臨床要求,可是一段時間以后測定結果趨高,并且日益明顯;而單獨測定該項目時測值又合理起來,給日常工作帶來極大的不便。因此避免試劑間的干擾,變的非常重要。

    試劑間的干擾有兩個的原因:一是試劑中含有下一個測試所要測定的底物,或是含有的某種試劑成分與下一反應所要測定的底物有作用,因而直接干擾下一反應的測定結果;另一個則是該試劑所引導的反應對下一個項目的反應進程帶來了間接的干擾,因為在有試劑污染的情況下,下一項目所測定的是前后兩個項目反應的綜合作用結果。下面通過對試劑成分的分析和相應試驗來找出試劑交叉污染可能帶來的情況,進而指導相應的項目調整和結果分析。

     

    1 試劑間可能發生的干擾情況

    1-1  ALTIFCC)、ASTIFCC)試劑中含有高活力LD成分,有可能會對LD的測定帶來干擾。

    1-2  ALPIFCC)、CKNAC-activated)、CK-MBNAC-activated)、CO2PEPC)、α-Amy(EPS)等試劑中使用磷酸緩沖液,可能會對其后的Mg2+ 測定帶來干擾。

    1-3  ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、      α-HBDH(DGKC)等試劑使用磷酸緩沖液,可能會對無機磷的測定帶來干擾。

    1-4  CKNAC-activated)、CK-MBNAC-activated)試劑中含有Glu成分,其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反應過程,因此可能對Glu測定帶來干擾,尤其對GluHK法測定可能帶來嚴重干擾。

    1-5  Mg2+試劑 (Calmagite)中含有EGTA成分,為Ca2+絡合劑,可能對Ca2+的測定帶來干擾。

    1-6  個別試劑以甘油做酶的保護劑,因此可能對TG的測定帶來干擾,等等。

     

    2 干擾的排查和發現

    事實上各個公司所提供的產品說明書常不能夠全面反映試劑組成的情況,因此通過實驗發現試劑交叉污染可能帶來的干擾變得相當重要。下面以兩個試驗來加以說明。

    2-1  將某一試劑作為樣本進行全套項目測定,考察結果的情況,進而確定發生試劑交叉污染時造成直接干擾的項目。

    2-2  1 份樣本分為兩份,一份加生理鹽水或其他適當的稀釋液,另一份加等量的試劑,同時測定、考察結果的變化,進而確定可能發生試劑交叉污染時造成干擾的項目。進行這一實驗時,使用半自動生化分析儀可能會得到更為理想的結果,尤其是針對雙試劑反應時,R1、R2加入時機可以得到更為精確的控制。

    此外,由于試劑成分的復雜多樣性,實時儀器狀況的獨特性,可能發生的試劑間的交叉污染的情況不盡相同。

     

    3 干擾的避免

    試劑間的嚴重干擾會極大的影響測定結果的準確性,因此隔絕二者間的聯系非常必要。一般在安排項目順序時要求兩個項目間至少要有一個非干擾項目,而最徹底的做法則是將被干擾項目置于干擾項目之前,以消除干擾發生的可能。同時要求檢驗人員對儀器的工作狀態要了如指掌,并在一個樣本的項目選擇或一個樣本的最后一項與下一樣本的第一個項目選擇時對于試劑交叉污染的可能性加以考慮,合理安排項目順序,以便得到更為合理的結果。

    通常情況下可以按照以下順序安排項目:ALT 、AST、 ALP、γ–GT 、ChE 、TP、 Alb 、TBIL、 DBIL 、Urea、 UA 、Cr、 CK 、CK-MB、α–HBDH 、LD、 Glu 、TG 、TC、 HDL-C、 LDL-C、αpoAI、αpoB、 α–Amy 、CO2 、P3-  、  Fe3+   Ca2+    Mg2+、。

    實際工作中,用全自動生化分析儀進行連續的多個項目的測定,每個反應的詳細過程難以探知,因此理論分析結合實際應用可以摸索出一套符合本單位工作的方法。

     

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